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菌種保藏方法有哪些?
時間:
2018-05-23 09:37
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如今生物保鮮已成為國內(nèi)外科研工作者研究的重點,利用微生物拮抗菌進行保鮮。菌種保藏方法有傳代保藏法、液體石蠟覆蓋保藏、冷凍干燥保藏、液氮超低溫保藏、蒸餾水保藏等菌種保藏方法,他們各有各的優(yōu)點,具體使用哪個方法,要針對不同的拮抗菌的特點及保藏目的需要,從而選擇最好的保藏方法。
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舉例說明:
液氮超低溫保藏法:是菌種長期保藏的最有效最可靠的方法。液超低溫保藏法是把菌種裝在含有冷凍保護劑的安瓶瓶內(nèi),將該安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏。由于菌絲體處于-196℃,其代謝降低到完全停止的狀態(tài)。甘油、血清蛋白、二甲基亞砜、聚乙烯氮戊環(huán)、糊精、吐溫80等可用做液氮低溫保藏法的保護劑,其中甘油在進入和游出細(xì)胞時速度非常緩慢,造成強烈的脫水,是目前最常用的保護劑。不同微生物要選擇不同的保護劑,再通過實驗加以確定保護劑的濃度,一般甘油為10%-20%、二甲基亞砜為5%-10%、聚乙烯氮戊環(huán)為0.4mmol/L。
冷凍干燥保藏法:為菌種保藏方法中最有效的方法之一。這種方法適用于菌種長期保存,一般可保存數(shù)年至十余年。因為冷凍干燥法使菌種處于一個無氧的真空環(huán)境中,微生物不能進行正常的新陳代謝,只能處于休眠狀態(tài)。當(dāng)環(huán)境變?yōu)檫m合生長的適合,才會繼續(xù)增殖生長。所以保藏期就比較長。目前像春雷霉素、頭孢霉素、卡那霉素等抗生素菌種不易產(chǎn)生孢子的絲狀真菌,都是采用冷凍干燥法保存的。另外我國大多數(shù)生物制品菌種都是采用該法保藏。
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